noticias de la compañía sobre No compres el mal, los tampones PIPES y HEPES son muy diferentes

En los experimentos bioquímicos y en los cultivos celulares, la elección del amortiguador adecuado es uno de los pasos clave para garantizar la exactitud y la estabilidad del experimento.El ácido N'-bis (((2-etanosulfónico)) y el ácido HEPES (4- ((2-hidroxietil)-1-piperazineetanosulfónico) son dos amortiguadores comúnmente utilizados.Aunque todos desempeñan un papel importante en el ajuste del pH de las soluciones, sus propiedades, escenarios de aplicación y precauciones son muy diferentes.El siguiente es un análisis detallado de las diferencias significativas entre PIPES y HEPES para ayudar a los investigadores científicos y técnicos de laboratorio a seleccionar y utilizar correctamente estos dos amortiguadores..

一- Propiedades químicas y solubilidad de las PIPES y HEPES
 

1. HEPES
 

(1) Propiedades químicas: El HEPES es un amortiguador zwitteriónico que contiene grupos de aminoácidos y sulfonos en su estructura molecular.que le permite amortiguar los cambios en la concentración de iones de hidrógeno en un amplio rango de pH (6.8-8.2) y mantener la estabilidad del pH de la solución.
 

(2) Solubilidad: El HEPES es altamente soluble en agua, lo que permite su fácil uso en una variedad de sistemas experimentales bioquímicos sin necesidad de pasos de disolución adicionales.

2. las tuberías
 

(1) Propiedades químicas: el PIPES es también un amortiguador ideal con un rango de pH ligeramente más estrecho que el HEPES, a 6,1-7.5El anillo de piperazina y los grupos de ácido sulfónico en su estructura molecular le dan la capacidad de amortiguar el pH en condiciones específicas.
 

(2) Solubilidad: a diferencia del HEPES, el propio PIPES es insoluble en agua, pero soluble en solución acuosa de NaOH.y sus propiedades de solubilidad deben considerarse en experimentos reales.

2- Escenarios de aplicación y diferencias funcionales entre los PIPES y los HEPES
 

1Aplicación del HEPES
 

(1) Cultivo celular: el HEPES se utiliza ampliamente en medios de cultivo celular de diversos tipos de organismos porque no es tóxico para las células y no interfiere con las reacciones bioquímicas normales.especialmente en sistemas experimentales que requieren un largo período de tiempo para mantener un valor de pH estable.
 

(2) Investigación de proteínas y enzimas: en la investigación de la estabilidad de las proteínas, el HEPES se utiliza a menudo como amortiguador porque puede mantener el pH de la solución constante durante mucho tiempo.que es beneficioso para el mantenimiento de la estructura y función de las proteínasAl mismo tiempo, también se utiliza en la investigación de proteínas y enzimas altamente volátiles y sensibles al pH.
 

(3) Biología molecular: en la extracción de ADN/ARN, los kits de diagnóstico por PCR y los kits de diagnóstico bioquímico, el HEPES es un componente tampón importante para garantizar la estabilidad del pH durante el experimento.
 

2Aplicación de las PIPES
 

(1) Purificación de proteínas: el PIPES tiene aplicaciones especiales en el campo de la purificación de proteínas,como la purificación de la tubulina mediante cromatografía de fosfocelulosa y la purificación de las proteínas recombinantes de unión al GTP ARF1 y ARF2 mediante filtración por gelSu característica de no formar complejos estables con la mayoría de los iones metálicos hace que funcione bien en sistemas de solución que contienen iones metálicos.
 

(2) Análisis cromatográfico: en la cromatografía por intercambio catiónico, el PIPES se utiliza a menudo como componente de amortiguador de unión o eluente,pero su concentración debe controlarse estrictamente para evitar errores experimentales causados por una resistencia iónica excesiva o cambios en el valor de pKa.
 

(3) Experimentos bioquímicos específicos: aunque el campo de aplicación de PIPES es relativamente estrecho, desempeña un papel insustituible como amortiguador en ciertos experimentos específicos.como el fosfato de calcio y el sistema de precipitación de ADN, AFM y experimentos de electroporación.

III. Precauciones para el uso de los tampones PIPES y HEPES
 

1. Precauciones para el HEPES
 

(1) Interferencia: aunque el HEPES no interfiere con los procesos bioquímicos en la mayoría de los casos, interfiere con la reacción entre el ADN y las enzimas de restricción.por lo que no es adecuado para experimentos que requieren un control preciso del corte de enzimas de ADNAl mismo tiempo, el método de Lowry no es adecuado para determinar el contenido de proteínas, lo que puede afectar a la exactitud de los resultados de determinación.
 

(2) Selección de la concentración: cuando se utiliza HEPES, se debe seleccionar la concentración adecuada de acuerdo con los requisitos experimentales.el medio de cultivo contiene a menudo 20 mmol/L de HEPES para lograr una capacidad de amortiguación suficiente.
 

2Precauciones para las tuberías
 

(1) Solubilidad: Antes de utilizar PIPES, asegúrese de que esté completamente disuelto en la solución acuosa de NaOH para evitar la interferencia de partículas no disueltas en el experimento.
 

(2) Formación de radicales libres: PIPES puede formar radicales libres, por lo que no es adecuado para su uso en experimentos que necesitan evitar reacciones redox.
 

(3) Dependencia de la concentración: el valor de pKa de PIPES depende de la concentración y su resistencia iónica es relativamente grande.Se debe prestar especial atención a la selección y control de la concentración.